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ELISA這些常見實驗方法的優(yōu)缺點

更新時間:2019-03-26 點擊量:2769

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  ELISA實驗是科研人員經(jīng)常用到的實驗方法。很多人覺得ELISA很簡單,其實不然。今天小編就帶大家了解下ELISA實驗的原理和常見辦法。

實驗原理

1.包被:抗原/抗體,固相化

2.反響: 1)待測抗體/抗原; 2)酶標(biāo)抗原/抗體

3.洗滌:使結(jié)合在固相上的抗原抗體復(fù)合物與未結(jié)合的別離

4.底物顯色:定性/定量剖析

 

 

常用辦法

1.間接法

檢測抗體常用的辦法, 首要用于對病原體抗體的檢測。

優(yōu)勢:二抗能夠加強(qiáng)信號,并且有多種挑選能做不同的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保留它多的免疫反響性。

缺陷:交互反響發(fā)生的機(jī)率較高

2.雙抗體夾心法

檢測大分子抗原常用的辦法。

優(yōu)勢:高活絡(luò)、高專一性,抗原無須事前純化。

缺陷:抗原必定得具有兩個以上的抗體結(jié)合部位。

3.競爭法

檢測小分子半抗原(藥物、激素等)。

優(yōu)勢:可適用比較不純的樣本,并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。

缺陷:全體的敏感性和專一性都較差。

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