日韩在线视频免费-日韩在线视频观看-日韩在线视频二区-日韩在线视频播放-国产一区二区三区亚洲欧美-国产一区二区三区视频

當(dāng)前位置:網(wǎng)站首頁技術(shù)文章 > 關(guān)于重組蛋白的特性

關(guān)于重組蛋白的特性

更新時間:2019-11-27 點(diǎn)擊量:1298

    重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,在-80℃條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進(jìn)行溶解,其中溶解的方法非常關(guān)鍵,因?yàn)槿芙獠缓脮档偷鞍椎男в谩H芤簯B(tài)保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細(xì)注意,這些都是用戶在實(shí)際應(yīng)用中經(jīng)常遇到的問題。

    (1)原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。大腸桿菌表達(dá)的凍干重組蛋白,已經(jīng)從包涵體中提純,添加了蛋白保護(hù)劑,使用過濾后的無菌水作為復(fù)溶劑即可,復(fù)溶凍干蛋白100μg,用86μl的超純水,輕輕搖晃使蛋白溶解,再用移液槍的槍頭輕吹幾下即可*溶解,一定不能使用渦旋儀進(jìn)行快速振蕩或劇烈搖晃。

    (2)真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白。有活性的蛋白質(zhì)不僅要轉(zhuǎn)錄和翻譯,還要進(jìn)行翻譯后的加工,使得蛋白質(zhì)的空間折疊方式維持正常,所以重組蛋白必須在真核細(xì)胞中進(jìn)行,如哺乳動物細(xì)胞能夠識別和去除基因中的內(nèi)含子,對翻譯后的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工,這樣表達(dá)的蛋白質(zhì)具有生物活性。我們用溶液態(tài)來保存,保持了其良好的活性和穩(wěn)定性。

    (3)重組蛋白的保護(hù)劑。在凍干和儲存過程中常用的保護(hù)劑或穩(wěn)定劑有糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。我們通常加8%(質(zhì)量比體積)的海藻糖和甘露醇作為凍干保護(hù)劑。海藻糖可明顯阻止蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)改變以及凍干過程中蛋白質(zhì)的伸展和聚集,甘露醇也是一種普遍應(yīng)用的凍干保護(hù)劑和填充劑

主站蜘蛛池模板: 久久国产精品视频一区 | 国产白丝jk制服又刺激又舒服| 日韩精品午夜| 青青青久热国产精品视频| 成人精品一区二区三区中文字幕| 国产3区| 亚洲欧美视频一区| 国产青草视频在线观看免费影院| 亚洲一区二区欧美日韩| 亚洲另类天天更新影院在线观看| 国产色在线 | 亚洲| 亚洲视频在线网| 久久精品免费看| 久久久一本| 草莓视频哟哟| 99re视频这里只有精品| 日本一区二区三区中文字幕 | 国产精品国三级国产aⅴ | 青青青在线视频| 免费99热在线观看| 欧美国产一区二区| 日本视频在线免费| 91色视频网站| 日韩欧美在线一区二区三区| 黄视频网站免费| 久久久一本| 亚洲综合日本| 欧美国产高清欧美| 欧美日韩精品乱国产| 免费大片黄在线观看yw| 国产精品一区二区 尿失禁| 色久视频| 国产一区二区精品久久91| 国产欧美一区二区| 青青草在视线频久久| 99久久综合精品免费| 成 人 黄 色 大 片全部| 91久久精品视频| 国产在线欧美日韩一区二区 | 国产在线视频99| 91国际|