昨天下午,有位客戶致電我司業務員咨詢ELISA顯色淡的原因及解決方法。問題解決之后,我司業務員將具體內容整理出,在這里分享給大家。這些個造成ELISA顯色淡原因的這些錯誤步驟你中招了嗎?
● 可能原因
1.試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高;
2.試劑盒未充分平衡;
3.培養箱溫度不足37℃;
4.保溫時間不足;
5.洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數增加;
6.移液器吸液量不足,吸嘴內壁掛水太多或內壁不清潔;
7.蒸餾水水質有問題;
8.底物作用時間不足。
● 解決方法
1.盡量縮短運輸時間,夏季應放冰塊降溫;
2.試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃);
3.注意培養箱溫度,放入反應板后盡量減少開啟次數以免影響溫度恒定,非隔水式培養箱尤其應注意;
4.校正定時鐘準確定時;
5.按說明書要求保留洗滌時間,準確記住洗滌次數;
6.校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密,吸嘴內壁要清潔,一次性使用;
7.使用新鮮合格的蒸餾水;
8.準確定時。
另外還有一個相關重點問題值得討論,上海恒遠技術員特別說明:①顯色一定要控制時間,根據試劑盒說明操作即可。一般來說,顯色時間過短,結果偏低;②顯色時間過長,空白增高或者非特異性顯色增加。